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5bar=0.5MPa,这个压力波动范围算是比较平稳的了。一般波动范围在10bar以上才叫做大。安捷伦有压力的在线监控,你可以看看波动曲线。
这个波动打不打主要取决于你正常运行时的压力。如果你运行的时候,压力在50bar以下,那么这个波动可能算是稍微有点儿大,如果你的运行压力在50bar以上,这个波动应该不会影响到你的实验。
如果你比较在意这个问题,首先一般压力波动大,先要排除气泡的原因。你的色谱柱,仪器管路里面是不是有气泡。流动相是不是过滤了。排气阀是不是正常。你是安捷伦的仪器,注意排气阀的滤芯,那个过滤白头是不是该换了。
第二,就是柱子的问题。同样一个实验,有的柱子做起了,压力就非常平稳,但是有的柱子就不行。你看看你的柱子怎么样,如果是国产的柱子,或者是使用过很多次很老很老的柱子,建议你换一根试试。因为里面的填料可能崩塌了,流动相一冲,压力就可能会不稳。
第三就是比较麻烦的问题,就是仪器配件的问题了。压力不稳可能是单向阀或者是密封圈的问题。如果有安捷伦同型号的仪器,可以互相换一下,排除一下问题。否则你只能请工程师上门来排查故障了。
你得分析一下为什么柱压高。
有的色谱柱出厂的时候柱压就很高,比如同样是迪马的色谱柱,一代柱压力低,二代柱压力高。虽然填料差不多,不过二代柱是国内填充的。可能工艺上不好。或者pH耐受范围广的,压力可能会高。这种情况不能改变。只能更换色谱柱。
如果是压力不高,而是之后实验过程导致,那也有很多可能。反正就是堵住了。因为不通所以压力高,处理的话通开了就好。
a.气泡堵住了。这种情况不但柱压高,而且波动大。用纯的甲醇或者乙腈低流速冲洗,色谱柱出口朝上,尽量让气泡从上面流出来
b.盐堵住了。这个只能是10-15%的甲醇水冲洗,把柱温加到35℃。看看能不能把盐溶出来
c.强保留物质。这个几乎没办法冲洗,每一根就柱子的柱前都不是填料本身的白色,而是**的。这个就是……样品溶液中的强保留物质。所以样品进入仪器前一定要过滤!拿甲醇反冲冲冲看吧,运气好可以冲掉。
d.微生物。一般老实验员不会犯这种错误,纯水或者纯盐的流动相,即便过滤了,最多放置一天。再久就会长细菌了。这个你自己看看流动相的瓶子,把里面的流动相倒出来,摸摸瓶壁如果滑滑的,那就是长细菌了。这个挺麻烦的,先用纯甲醇冲洗,然后用DMF低流速冲洗,据说可以冲掉70%的细菌和细菌尸体。
目前就想到这些,再多了只能你结合试验情况自己分析了。
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